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超濾(UF)常用于分離溶液中極其微小的顆粒和不溶分子。雖然分離效果受到包括化學(xué)性質(zhì)、電荷等多種因素影響,這種方法主要還是以分子大小為**基本的考慮。超濾膜截留1-1000kDa(MW)的分子,鹽和水等小分子會(huì)透過,因此在大分子樣品處理中得到了應(yīng)用。膠狀或微粒狀物質(zhì)也能夠被截留。UF膜既可以用于透過樣品也用于保留樣品的純化。樣品***小于膜孔徑,則經(jīng)過膜處理可以達(dá)到除熱源、澄清和與大分子污染物的分離的效果。如果目的分子遠(yuǎn)遠(yuǎn)大于膜孔徑,膜處理則可以將小分子污染物去除而目的分子被濃縮。超濾方法相比沉淀法對(duì)于樣品更溫和,沒有發(fā)生容易導(dǎo)致生物大分子失活的相變,而且在濃縮的同時(shí)可以完成對(duì)溶質(zhì)的除鹽。超濾的應(yīng)用不限于蛋白樣品的操作,也常用于核酸樣品制備,包括分子克隆和質(zhì)粒純化。DNA和RNA樣品起始濃度低至5ng/mL也可以被高效地在數(shù)分鐘內(nèi)被濃縮,回收率達(dá)到99%以上。上海超濾濃縮管哪家比較專業(yè)。青浦區(qū)離心濃縮管規(guī)格
微濾中膜的孔徑大小通常以微米計(jì),表示大于這一規(guī)格的顆粒將被膜截留。超濾膜根據(jù) NMWL分級(jí),有時(shí)也用截留分子量(MWCO)。NMWL表示大多數(shù)大于這個(gè)值的分子將在超濾時(shí)截留。一個(gè)確定NMWL的超濾膜應(yīng)該截留至少90%以上的這個(gè)大小的球形分子。但為了保險(xiǎn)起見,實(shí)踐中選擇的膜孔徑要小于目的分子。緩沖液置換時(shí)膜截留分子量應(yīng)該充分大于流過的溶質(zhì)。當(dāng)膜材料相同時(shí),孔徑減小 會(huì)增加排阻而減小濾過率。截留及產(chǎn)物回收的影響因素包括分子的形狀、帶電性質(zhì)、樣品濃度及組成成分、操作條件、使用的設(shè)備構(gòu)造等。因此常常發(fā)生同樣 NMWL 的膜對(duì)一定范圍內(nèi)的不同分子截留效果有一定差異的情況。使用超濾方法進(jìn)行樣品濃縮或除鹽時(shí),需要謹(jǐn)慎地選擇合適的NMWL膜和設(shè)備。常州默克0.5ml超濾濃縮管訂購(gòu)您知道益啟生物公司的超濾濃縮管系列都有哪些嗎?
用于攪拌式超濾杯的Ultracel?預(yù)切超濾膜片 Ultracel? 再生纖維素膜可以用來對(duì)較為稀釋的溶液進(jìn)行脫鹽或濃縮。Ultracel? 膜是親水性的,微觀結(jié)構(gòu)緊密,確保對(duì)蛋白、核酸等大分子吸附比較低而回收率比較高。 *膜的常規(guī)截留分子量分為1, 3, 5, 10, 30及 100 kDa等。 *膜片直徑分為25, 44.5, 47, 63.5, 76, 90及150 mm。 對(duì)于大體積、高濃度(如蛋白濃度大于 1.0 mg/mL)的樣品進(jìn)行脫鹽和濃縮,Biomax?聚苯醚砜(PES)超濾膜是很好的選擇。血清、血漿或條件組織培養(yǎng)基等,都是 Biomax?超濾膜適合處理的樣品。 *膜的常規(guī)截留分子量為5,10,30, 50, 100, 300和500kDa等。 *膜直徑分為25,44.5,47,63.5和76mm。
蛋白親和純化(無需換液和濃縮) * 本操作受Amicon? Ultra-0.5 mL超濾管~1 mg蛋白的容量限制。體積較大而蛋白濃度較低的情況下也可以采用如上方法,但溶液體積和離心時(shí)間等需要略加優(yōu)化。 3次低速離心,總耗時(shí)~75分鐘(含60分鐘孵育時(shí)間) 1. 在Amicon? Pro上樣池中加入至多1000μL親和純化樹脂(沉降的柱床體積)和至多9 mL漂洗緩沖液。1,000×g離心1 min平衡樹脂。(柱床)樹脂量≥ 500μL時(shí)采用2,000×g離心4 min。 2. 加入至多9 mL樣品并與樹脂吸打混勻。孵育1 h*,其間可溫和攪動(dòng)促進(jìn)結(jié)合。益啟生物公司的超濾濃縮管系列有很多。
離心方式的超濾方法進(jìn)行溶液置換也被稱為“滲濾”,操作時(shí)樣品首先被濃縮,繼而加入新的溶液,再次濃縮時(shí),原溶液已經(jīng)被換成選定的溶液。 化學(xué)相容性與溶出 樣品的化學(xué)背景有時(shí)很多樣而復(fù)雜,過濾的過程中很重要的一點(diǎn)是操作過程不應(yīng)給樣品帶來新的污染。所以濾膜和裝置與樣品接觸的其它部分都不能與樣品中的化學(xué)成分發(fā)生反應(yīng)而產(chǎn)生溶出污染。關(guān)于默克密理博各種微濾、超濾產(chǎn)品的化學(xué)相容性請(qǐng)參考產(chǎn)品使用說明書或垂詢技術(shù)支持專線 ?;厥章始捌渲匾猿瑸V的**終目的常常是很大程度地回收目標(biāo)溶質(zhì),但膜的很多特性會(huì)對(duì)這一目的產(chǎn)生影響。影響回收的因素包括:? 標(biāo)稱分子量限制(NMWL)/ 核酸截留分子量(NCO)? 截留 ? 濃差極化 ? 通量益啟生物公司就帶您了解一下超濾濃縮管的特點(diǎn)。常州默克超濾濃縮管聯(lián)系人
超濾濃縮管的優(yōu)缺點(diǎn)您知道嗎?青浦區(qū)離心濃縮管規(guī)格
這種小管適合在1.5mL離心機(jī)中使用,其Ultracel?超濾膜對(duì)于蛋白及其它成分都表現(xiàn)出 極低的非特異性結(jié)合,連同醫(yī)藥級(jí)O型圈封閉設(shè)計(jì),確保更少的樣品丟失,更穩(wěn)定的數(shù)據(jù)結(jié)果。諸多考慮周到的精細(xì)設(shè)計(jì)使Microcon?成為比較好用的樣品制備工具之一。 特點(diǎn)與優(yōu)點(diǎn): 低吸附膜和反轉(zhuǎn)回收設(shè)計(jì),即使是小體積、低濃度樣品得率也能達(dá)到95%以上 可以用產(chǎn)品自帶的1.5mL樣品收集管存儲(chǔ)濾過液和濃縮產(chǎn)物 濃縮倍數(shù)可達(dá)100X 操作簡(jiǎn)便快捷,易于標(biāo)準(zhǔn)化。 Microcon? DNA Fast Flow 超濾管 專門設(shè)計(jì)用于從含有SDS的溶液中濃縮和回收基因組DNA。管子和膜均為低非特異性吸附的材質(zhì),醫(yī)用級(jí)O型圈密封,保證了在洗滌步驟中樣品丟失**少。反轉(zhuǎn)回收設(shè)計(jì),即使樣品量很小也能獲得理想的得率,濃縮倍數(shù)可以達(dá)到20X。青浦區(qū)離心濃縮管規(guī)格