.53+0.03;1.09+0.03、1.51+0.05;1.37士0.03、1.43+0.03;0.81+0.02。提取不同土壤基因組DNA結果,有機營養(yǎng)土上樣3μL其余土壤上樣8μL;M: 1kb plus DNA ladder,Lane 1-4:自動化提??;Lane5-8:手工提?。籐ane 1&5: 100mg有機營養(yǎng)土;Lane 2&6: 100mg花壇土;Lane 3&7: 250mg鹽堿土;Lane 4&8: 250mg沙漠土。提取不同類型土壤DNA進行PCR及酶切結果。M: 1kb plus DNA ladder;Lane 1:有機營養(yǎng)土;Lane 2:花壇土;Lane 3:鹽堿土;Lane 4土壤DNA提取的直銷公司。江蘇土壤DNA提取土壤DNA提取代理價
樣本,5-6m/s,研磨20-40s,難裂解樣本研磨2個循環(huán),增加研磨力度,提取按土壤試劑盒提取protocol進行?!ぽ^軟的樣本,仍然可以采用介質(zhì)E,提高裂解的劇烈程度,增加研磨速度和時間,增加研磨次數(shù)。不僅如此,我們還有文獻支持。參考文獻1:·樣本類型:葡萄枝·樣本粉碎:使用液氮和攪拌機將植物材料在無菌鋼瓶中粉碎?!颖玖呀猓篎astPrep-24TM 5G,介質(zhì)E裂解?!颖綝NA提?。篎astDNA Spin Kit for Soil提取?!は掠螌嶒灒杭毦?6S rD浦東新區(qū)土壤微生物DNA土壤DNA提取聯(lián)系方式益啟生物公司帶您了解土壤DNA提取詳情。
加入500 ul漂洗液,混勻,上磁力架吸附1分鐘,吸棄上清;70℃加熱3分鐘;加入20 ul洗脫液,震蕩混勻,70℃加熱3分鐘;上磁力架吸附1分鐘,上清DNA溶液轉移至新的離心管中。 2)PCR擴增及電泳 PCR擴增使用Identifiler Plus試劑盒,10 μl擴增體系中含4 μl master mix、2 μl primer set、4 μl模板,擴增程序為,95℃,11分鐘;94℃,20 秒,59℃,3分鐘,30個循環(huán);60℃,10分鐘;4℃保存;電泳在ABI 3500XL儀器中進行;電泳上樣體系為,1 μl PCR產(chǎn)物,9 μl甲酰胺,其中已加Liz。 以上所述*為本發(fā)明的具體實施方式而已,并不用于限制本發(fā)明,對于本領域的技術人員來說,本發(fā)明可以有各種更改和變化;凡在本發(fā)明的精神和原則之內(nèi)所作的任何修改、等同替換、改進等,均應包含在本發(fā)明的保護范圍之內(nèi)。
(c)漂洗液,所述漂洗液為70-80%乙醇; (d)洗脫液,其組分為:10 mmol/L Tris-HCl,0.1 mmol/L 乙二胺四乙酸二鈉,pH 8.0; (e)硅基DNA吸附材料,所述硅基DNA吸附材料為二氧化硅納米顆粒、硅膠膜、玻璃纖維膜、石英膜、二氧化硅包裹的磁性納米顆粒中的任意一種。 使用本發(fā)明的試劑盒,用以提取土壤尿液DNA的方法,包括以下步驟: 1)DNA提取 用土壤裂解液和蛋白酶K裂解含有尿液的土壤樣品,離心分離土壤和上清液,上清液加入結合液,混合后加入硅基DNA吸附材料,分離硅基DNA吸附材料和液體,漂洗硅基DNA吸附材料,洗脫DNA;具體包括以下步驟: a.刮取含有尿液的表層土壤,烘干,上海益啟生物公司土壤DNA提取的優(yōu)勢。
94℃,20 秒,59℃,3分鐘,30個循環(huán);60℃,10分鐘;4℃保存;電泳在ABI 3500XL儀器中進行;電泳上樣體系為,1 μl PCR產(chǎn)物,9 μl甲酰胺,其中已加Liz。 實施例5 以二氧化硅包裹的磁性納米顆粒提取土壤尿液DNA 1)DNA提取 刮取含有尿液的表層土壤,烘干,取100-200 mg土壤樣品,加入樣品管中,然后加入400 ul土壤裂解液和20 ul 蛋白酶k,震蕩混勻后,75℃加熱裂解15分鐘;最大轉速離心5分鐘,將上清液轉移至新的樣品管中,加入800 ul結合液,混勻;混合液轉移至裝有15 ul二氧化硅包裹的磁性納米顆粒的離心管中,混勻后靜止15分鐘;上磁力架吸附2分鐘,吸棄上清液;加入500 ul漂洗液,混勻,上磁力架吸附1分鐘,吸棄上清;上海益啟,采購土壤DNA提取的放心之選。靜安區(qū)土壤DNA提取土壤DNA提取商家
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取100-200 mg土壤樣品,加入樣品管中,然后加入400 ul土壤裂解液和20 ul 蛋白酶k,震蕩混勻后,75℃加熱裂解15分鐘; b.最大轉速離心5分鐘,將上清液轉移至新的樣品管中,加入800 ul結合液,混勻; c.將上一步的混合液轉移至硅基DNA吸附材料,分離液體和硅基DNA吸附材料; d.用漂洗液漂洗硅基DNA吸附材料; e.用洗脫液洗脫硅基吸附材料中的DNA; 2)PCR擴增及電泳 將上步純化的DNA進行PCR擴增,在電泳儀中檢測DNA。 本發(fā)明具有以下有益效果: 本發(fā)明的土壤尿液DNA提取試劑盒及方法,配制好土壤裂解液、結合液、漂洗液、洗脫液,利用特殊成分的土壤裂解液,在加入結合液之前,樣品土壤來源的二氧化硅不與DNA結合,離心分離固體顆粒和溶解了DNA的上清液,上清液中加入結合液,混合后轉入含有硅基DNA吸附材料中,分離液體和硅基DNA吸附材料,漂洗硅基DNA吸附材料,洗脫獲得純化DNA;江蘇土壤DNA提取土壤DNA提取代理價